双缩脲谁发明

Ⅰ 谁知道菲林试剂 双缩脲试剂 本尼迪特试剂有什么区别

Fehling试剂：由0.1g/ml的NaOH溶液、0.05g/ml的CuSO4溶液以及KNaC4H4O6（酒石酸钠钾）混合而成，反应的成分是版酒石酸合铜(Ⅱ权)离子，碱性条件下加热时与醛基或乙酰基反应生成Cu2O沉淀。该试剂分为A、B液，先混合再使用，需要现用现配。
双缩脲试剂：由0.1g/ml的NaOH溶液及0.01g/ml的CuSO4溶液组成，反应的成分是碱性环境中的Cu2+，与酰胺键结合成紫色配合物。该试剂分为A、B液，先加NaOH，再加CuSO4，需要现用现配。
Benedict试剂：173gNa3C6H5O7（柠檬酸钠）及100g无水Na2CO3溶解在800ml水中，再取17.3gCuSO4·5H2O溶解在100ml水中，混合并定容至1L（如有沉淀可过滤），即得到Benedict试剂。反应的成分是柠檬酸合铜(Ⅱ)离子，在碱性环境中（由Na2CO3水解产生OH-）加热时与醛基（甲醛除外）或乙酰基反应生成Cu2O沉淀。该试剂可以长期保存。

Ⅱ 蛋白定量检测方法--双缩脲法，即Biuret法，在什么时候，由谁提出的

金标法C-反应蛋白全血定量检测方法

发布时间:02年[$mon
原理： CRP是一种固相的夹心法免疫试验。稀释后的样品加于卡片上6个试验孔中的1孔，标本流过反应膜，CRP分子即被固定于膜上的CRP特异性单克隆抗体所捕获，CRP将和随后加入的胶体金抗体结合物相结合，发生双抗体夹心法的反应。未结合的金标抗体，用一滴洗涤液将其从膜上清除，滤纸层将吸收过剩的液体。在标本中CRP达到病理的水平，膜上出现紫红色，颜色的强度和CRP浓度比例有关。颜色的强度可以用肉眼观察和参考比色卡相比较作出半定量的估计，或者用NycoCard READER金标定量仪作定量测定。

特异性：
----在试验中应用了抗人CRP的特异的单克隆抗体。没有发现其他的血液成份在这个NycoCard CRP试验系统中有交叉反应。

标准化：
NycoCard CRP全血法是以CRM470（IFCC／BCR／CAP参考品）所校准的。

测定范围：
CRP 10－200mg／L

精确度：
在质控实验室的试验，通常可得到的精确度是变异系数（CV）5－8％。这和整个测定的范围，也和仪器读结果有关。

干扰因素：
用肝素、枸橼酸钠或EDTA不影响试验。增高的胆红素水平、脂类或类风湿因子（RF）不影响试验的结果。当血球比积大于50％，应该加以校正。

试验盒组成，（48人份）
试验卡片：4×2PCS
每个试验卡片有6个试验孔，这些孔下方垫有渗水的包被抗CRP单克隆抗体的膜。
R1 稀释液：2×26×1.0ml
硼酸盐缓冲液（PH9.0）及洗涤剂。
R2结合物：1×3.0ml
含有用胶体金标记的抗CRP单克隆抗体的磷酸盐缓冲液。
R3洗涤剂：1×4.5ml
磷酸盐含钠缓冲液（PH7.4）及洗涤剂。
阳性质控品：1×0.5ml
加入纯化的CRP的人血清。CRP浓度在标签上。
毛细吸管：50支
25ul含有肝素钠的玻璃毛细管。
滴吸管：2支
分别用于R2结合物（黑帽）和R3洗涤液（白帽）
参考色谱图：1只
在塑料棒上带有颜色区带，指示出从10到200mg／L的5个CRP水平。为了肉眼观察的结果作解释。
塑料袋：2只
1个袋存放已使用的卡片，多余的卡片储存在另一袋中。
但试剂盒不提供需用的材料：
25ul吸管及吸管头，加标本时用。

注意点：
试剂盒有叠氮钠，有毒性，在R1、R2及R3中的浓度为0.02％，在阳性对照物中<0.1％。R1含有清洁剂，对眼及皮肤有刺激。阳性对照品的制备是用斯堪的那维亚血液中心志愿献血员的血，各个经检查乙肝S抗原，丙肝抗体及HIVI和II抗体为阴性。虽然如此，处理质控品应当像对病人标本一样谨慎小心。

稳定性及储存
在到期的日期内使用，要求试剂盒在密封的状态，在原始的容器内，储存在2－8℃。避免直接的阳光，避免在30℃以上的温度下暴露，不能冰冻。应完全按照指导使用试剂盒。
R1：存放在冰箱或室温下，在效期之前是稳定的，临用前放到室温下（15－25℃）。
R2和R3，打开的：在2－8℃是稳定的直到有效期，在15－25℃（工作完毕后置冰箱），4星期内是稳定的。
试验卡片，打开铝箔袋：在2－25℃（工作完毕放冰箱）四周是稳定的，剩下的卡片在2－8℃保持12个星期，在15－25℃为4周。各个都要关紧塑料袋口和试剂盒一起保存。
已开封的对照品：在2－8℃下4周内是稳定的，要无污染。
血标本（抗凝）：在2－8℃稳定3天。
用R1稀释的血标本：在2－8℃保持8小时。
此外，用R1稀释的EDTA血在细胞完全溶解后应立即测定。

试验步骤
重要的操作注意点
·不能使用不同批号中的试剂
·在应用前把R1稀释液带入室温（15－25℃）
·R2结合物，R3洗涤液及试验卡片能在冷或平衡到室温应用。
·在试验孔的下面注上病人或质控鉴别
·吸管头或手不能接触试验膜
·在每步加液之间换吸管头
·在用后将螺帽旋紧

标本材料：
带有或不带有抗凝剂（肝素、枸橼酸盐或EDTA）的毛细管血及静脉血都能用。
质量控制：
阳性控制品应当用来证实试剂的功效及试验的正确操作。这控制品的试验按照病人标本的同样操作。测定值应当在标贴上标明的范围以内。

操作步骤：
1． 标本稀释
加25ul血标本或质控品到含有R1稀释液的试管中，盖紧试管并有力地混匀达10秒。如静置试管至少45秒。
注意：R1稀释液必须达到室温，轻轻揩去毛细管外面或吸管头外面过剩的液体。在加到卡片以前用眼观察，确保稀释的样本是澄清的。
2． 样本的使用
加入25ul稀释的血样本或稀释的质控品于预定的反应孔。使稀释的样本浸湿卡片（10－20秒）。
注意：轻轻地揩去吸管头外面过剩的液体。
3． R2结合物的使用
加1滴（或50ul）结合物（黑盖）于试验孔。让结合物浸湿卡片（20－30秒）。
注意：吸管头应当垂直，并在试验孔上方约1cm。
4． R3洗涤液的应用
加1滴洗涤液（白帽）到试验孔。使溶液浸湿卡片，在读结果前使颜色稳定（20－30秒）。在5分钟内读取结果。
注意：吸管头应被垂直握着，并在试验孔上方1cm。

结果判读
肉眼观察：
样品的CRP浓度是将试验的反应和参考图谱相比较之后被估计的。色谱的区带符合于下面的血样本的血清部分中的CRP浓度：10mg／L，25mg／L，50mg／L，100mg/L，200mg／L试验结果被推荐以下方式作报告：
试验反应的颜色 CRP浓度
比10mg／L区带的颜色浅 ＜10mg／L
和区带等同 和区带一致
在2个区带之间 估计值在2区带之间
比200mg／L区带的颜色深 ＞200mg／L

仪器测读
NycoCard READER作为定量测定其结果。按照仪器手册读结果。

血球比积的影响：
血球比积超过50％的样本，其试验结果应该按表随各个系数而增加。
血球比积％ 50 55 60 65 70 75 80

系数 1.2 1.3 1.5 1.7 2.0 2.4 3.0
血容比积参考范围：女子35－44％ 男子39－48％
正常CRP水平（≤10mg／L）
血清CRP参考范围通常报告在10mg／L以下。NycoCard CRP结果等同或小于10mg／L被认为是正常的。

增高的CRP水平（＞10mg／L）
CRP水平大于10－15mg／L通常被认为是病理性的。病毒及轻度细菌感染，CRP浓度适度增加（达50mg／L）。当严重的细菌感染就显著增加（大于60mg／L）。

注意事项
·在加样本到试验孔时开成气泡，应重新试验
·血细胞溶解不完全。R1洗涤液需放在室温（15－25℃），有力地混匀稀释的样本（约10
秒）。将试管放置至少45秒。
·由于离白血球水平（＞60×109／L）、纤维物质及血细胞不完全溶解，而减少样本流过滤
膜。如果在15－25℃溶解时间之后稀释样本仍然混浊，离心，用上清液加到卡片上。
·不准确的吸管要进行校正吸管。
·在R2结合物完全浸湿卡片之前就加R3洗涤液，这将导致假阳性结果。
·血细胞不完全溶解或渗滤受阻也可能导致假阳性结果。

Ⅲ 蛋白质浓度测定 双缩脲法实验步骤谁能介绍下

蛋白质浓度测定 双缩来脲法原理

将尿自素加热，两分子尿素放出一分子氨而形成双缩脲（NH2-CO-NH-CO-NH2）。
双缩脲在碱性溶液中与Cu2+结合生成紫色络合物，这一呈色反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中的肽键类似双缩脲结构，故亦能呈双缩脲反应。
生物帮上面有这方面的详细介绍， 生物问答 http://www.bio.com/

Ⅳ 斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别

1、作用不同：

斐林试剂是新配制的溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应。

2、配置方法不同：

斐林试剂配制方法：0.1 g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配制方法是将50 g氢氧化钠和137 g酒石酸钾钠溶于500 mI蒸馏水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。乙液配制方法是将34.5 g结晶硫酸铜溶于500 ml水中，加0.5 mI硫酸。混合均匀。

双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液.先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。

3、使用方法不同：

斐林试剂使用时，先反溶液和溶液混合（将滴溶液滴入溶液中），而后立即使用。

双缩脲试剂使用时，先加入溶液（2mL），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴溶液，振荡摇匀后观察现象。

(4)双缩脲谁发明扩展阅读：

斐林试剂是德国化学家赫尔曼·冯·斐林在1849年发明的。常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在。斐林试剂与单糖中的还原性糖（即醛糖）反应生成砖红色沉淀。

双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。

Ⅳ 班氏试剂和双缩脲试剂有什么区别

两者都是制由硫酸铜和氢氧化钠配出的，但比例不同。

本尼迪特试剂，也称班氏试剂、本尼迪克试剂、本尼迪克试液，班乃德试剂或本尼迪特试剂，是一种浅蓝色化学试剂,为斐林试剂的改良试剂
双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。遇到蛋白质显紫色。
斐林试剂(Fehling's solution)是德国化学家斐林（Hermann vonFehling，1812年--1885年）在1849年发明的。它是由氢氧化钠的含量为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的含量为0.05 g/mL的溶液，还有含量为0.2g/mL酒石酸钾钠配制而成的，其本质是新配制的氢氧化铜。

Ⅵ 血清总蛋白测定 双缩脲比色法的原理 有谁知道

大鼠血清总蛋白含量测定（双缩脲比色法）
一．原理
蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成。肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物。测定紫红色络合物的吸光度，能计算总蛋白的含量。
二．目的
1．掌握血清总蛋白含量的测定方法。
2．观察阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化。
3．观察中药对阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化。
三．试剂
1．总蛋白试剂
硫酸铜0.12 mmol/L
酒石酸钾钠21.1 mmol/L
氢氧化钠0.75 mmol/L
2．蛋白标准液：血清白蛋白50g/L
四．材料
1．试管（100*16mm）3支
2．移液器（P20ul、P200ul、P1000ul）各1把
3．石英比色皿（1ml）4只
五．测定方法
单位: ul

空白管（b）
标准管（std）
测定管（s）

H2O

蛋白标准液（50.0g/L）

样品

总蛋白试剂
10.5

－

－

1050
－

10.5

－

1050
－

－

10.5

1050

混匀，室温放置30分钟，以空白管校零，测定550nm处的吸光度。
六．计算
总蛋白含量（g/L）＝（测定管吸光度/标准管吸光度）×标准液浓度
七．注意事项
1．室温放置30分钟后必须立即测定吸光度，否则吸光度会增加。
2．实验试剂用量较少，所以加量一定要仔细、准确。