雙縮脲誰發明

Ⅰ 誰知道菲林試劑 雙縮脲試劑 本尼迪特試劑有什麼區別

Fehling試劑：由0.1g/ml的NaOH溶液、0.05g/ml的CuSO4溶液以及KNaC4H4O6（酒石酸鈉鉀）混合而成，反應的成分是版酒石酸合銅(Ⅱ權)離子，鹼性條件下加熱時與醛基或乙醯基反應生成Cu2O沉澱。該試劑分為A、B液，先混合再使用，需要現用現配。
雙縮脲試劑：由0.1g/ml的NaOH溶液及0.01g/ml的CuSO4溶液組成，反應的成分是鹼性環境中的Cu2+，與醯胺鍵結合成紫色配合物。該試劑分為A、B液，先加NaOH，再加CuSO4，需要現用現配。
Benedict試劑：173gNa3C6H5O7（檸檬酸鈉）及100g無水Na2CO3溶解在800ml水中，再取17.3gCuSO4·5H2O溶解在100ml水中，混合並定容至1L（如有沉澱可過濾），即得到Benedict試劑。反應的成分是檸檬酸合銅(Ⅱ)離子，在鹼性環境中（由Na2CO3水解產生OH-）加熱時與醛基（甲醛除外）或乙醯基反應生成Cu2O沉澱。該試劑可以長期保存。

Ⅱ 蛋白定量檢測方法--雙縮脲法，即Biuret法，在什麼時候，由誰提出的

金標法C-反應蛋白全血定量檢測方法

發布時間:02年[$mon
原理： CRP是一種固相的夾心法免疫試驗。稀釋後的樣品加於卡片上6個試驗孔中的1孔，標本流過反應膜，CRP分子即被固定於膜上的CRP特異性單克隆抗體所捕獲，CRP將和隨後加入的膠體金抗體結合物相結合，發生雙抗體夾心法的反應。未結合的金標抗體，用一滴洗滌液將其從膜上清除，濾紙層將吸收過剩的液體。在標本中CRP達到病理的水平，膜上出現紫紅色，顏色的強度和CRP濃度比例有關。顏色的強度可以用肉眼觀察和參考比色卡相比較作出半定量的估計，或者用NycoCard READER金標定量儀作定量測定。

特異性：
----在試驗中應用了抗人CRP的特異的單克隆抗體。沒有發現其他的血液成份在這個NycoCard CRP試驗系統中有交叉反應。

標准化：
NycoCard CRP全血法是以CRM470（IFCC／BCR／CAP參考品）所校準的。

測定范圍：
CRP 10－200mg／L

精確度：
在質控實驗室的試驗，通常可得到的精確度是變異系數（CV）5－8％。這和整個測定的范圍，也和儀器讀結果有關。

干擾因素：
用肝素、枸櫞酸鈉或EDTA不影響試驗。增高的膽紅素水平、脂類或類風濕因子（RF）不影響試驗的結果。當血球比積大於50％，應該加以校正。

試驗盒組成，（48人份）
試驗卡片：4×2PCS
每個試驗卡片有6個試驗孔，這些孔下方墊有滲水的包被抗CRP單克隆抗體的膜。
R1 稀釋液：2×26×1.0ml
硼酸鹽緩沖液（PH9.0）及洗滌劑。
R2結合物：1×3.0ml
含有用膠體金標記的抗CRP單克隆抗體的磷酸鹽緩沖液。
R3洗滌劑：1×4.5ml
磷酸鹽含鈉緩沖液（PH7.4）及洗滌劑。
陽性質控品：1×0.5ml
加入純化的CRP的人血清。CRP濃度在標簽上。
毛細吸管：50支
25ul含有肝素鈉的玻璃毛細管。
滴吸管：2支
分別用於R2結合物（黑帽）和R3洗滌液（白帽）
參考色譜圖：1隻
在塑料棒上帶有顏色區帶，指示出從10到200mg／L的5個CRP水平。為了肉眼觀察的結果作解釋。
塑料袋：2隻
1個袋存放已使用的卡片，多餘的卡片儲存在另一袋中。
但試劑盒不提供需用的材料：
25ul吸管及吸管頭，加標本時用。

注意點：
試劑盒有疊氮鈉，有毒性，在R1、R2及R3中的濃度為0.02％，在陽性對照物中<0.1％。R1含有清潔劑，對眼及皮膚有刺激。陽性對照品的制備是用斯堪的那維亞血液中心志願獻血員的血，各個經檢查乙肝S抗原，丙肝抗體及HIVI和II抗體為陰性。雖然如此，處理質控品應當像對病人標本一樣謹慎小心。

穩定性及儲存
在到期的日期內使用，要求試劑盒在密封的狀態，在原始的容器內，儲存在2－8℃。避免直接的陽光，避免在30℃以上的溫度下暴露，不能冰凍。應完全按照指導使用試劑盒。
R1：存放在冰箱或室溫下，在效期之前是穩定的，臨用前放到室溫下（15－25℃）。
R2和R3，打開的：在2－8℃是穩定的直到有效期，在15－25℃（工作完畢後置冰箱），4星期內是穩定的。
試驗卡片，打開鋁箔袋：在2－25℃（工作完畢放冰箱）四周是穩定的，剩下的卡片在2－8℃保持12個星期，在15－25℃為4周。各個都要關緊塑料袋口和試劑盒一起保存。
已開封的對照品：在2－8℃下4周內是穩定的，要無污染。
血標本（抗凝）：在2－8℃穩定3天。
用R1稀釋的血標本：在2－8℃保持8小時。
此外，用R1稀釋的EDTA血在細胞完全溶解後應立即測定。

試驗步驟
重要的操作注意點
·不能使用不同批號中的試劑
·在應用前把R1稀釋液帶入室溫（15－25℃）
·R2結合物，R3洗滌液及試驗卡片能在冷或平衡到室溫應用。
·在試驗孔的下面註上病人或質控鑒別
·吸管頭或手不能接觸試驗膜
·在每步加液之間換吸管頭
·在用後將螺帽旋緊

標本材料：
帶有或不帶有抗凝劑（肝素、枸櫞酸鹽或EDTA）的毛細管血及靜脈血都能用。
質量控制：
陽性控製品應當用來證實試劑的功效及試驗的正確操作。這控製品的試驗按照病人標本的同樣操作。測定值應當在標貼上標明的范圍以內。

操作步驟：
1． 標本稀釋
加25ul血標本或質控品到含有R1稀釋液的試管中，蓋緊試管並有力地混勻達10秒。如靜置試管至少45秒。
注意：R1稀釋液必須達到室溫，輕輕揩去毛細管外面或吸管頭外面過剩的液體。在加到卡片以前用眼觀察，確保稀釋的樣本是澄清的。
2． 樣本的使用
加入25ul稀釋的血樣本或稀釋的質控品於預定的反應孔。使稀釋的樣本浸濕卡片（10－20秒）。
注意：輕輕地揩去吸管頭外面過剩的液體。
3． R2結合物的使用
加1滴（或50ul）結合物（黑蓋）於試驗孔。讓結合物浸濕卡片（20－30秒）。
注意：吸管頭應當垂直，並在試驗孔上方約1cm。
4． R3洗滌液的應用
加1滴洗滌液（白帽）到試驗孔。使溶液浸濕卡片，在讀結果前使顏色穩定（20－30秒）。在5分鍾內讀取結果。
注意：吸管頭應被垂直握著，並在試驗孔上方1cm。

結果判讀
肉眼觀察：
樣品的CRP濃度是將試驗的反應和參考圖譜相比較之後被估計的。色譜的區帶符合於下面的血樣本的血清部分中的CRP濃度：10mg／L，25mg／L，50mg／L，100mg/L，200mg／L試驗結果被推薦以下方式作報告：
試驗反應的顏色 CRP濃度
比10mg／L區帶的顏色淺 ＜10mg／L
和區帶等同 和區帶一致
在2個區帶之間 估計值在2區帶之間
比200mg／L區帶的顏色深 ＞200mg／L

儀器測讀
NycoCard READER作為定量測定其結果。按照儀器手冊讀結果。

血球比積的影響：
血球比積超過50％的樣本，其試驗結果應該按表隨各個系數而增加。
血球比積％ 50 55 60 65 70 75 80

系數 1.2 1.3 1.5 1.7 2.0 2.4 3.0
血容比積參考范圍：女子35－44％ 男子39－48％
正常CRP水平（≤10mg／L）
血清CRP參考范圍通常報告在10mg／L以下。NycoCard CRP結果等同或小於10mg／L被認為是正常的。

增高的CRP水平（＞10mg／L）
CRP水平大於10－15mg／L通常被認為是病理性的。病毒及輕度細菌感染，CRP濃度適度增加（達50mg／L）。當嚴重的細菌感染就顯著增加（大於60mg／L）。

注意事項
·在加樣本到試驗孔時開成氣泡，應重新試驗
·血細胞溶解不完全。R1洗滌液需放在室溫（15－25℃），有力地混勻稀釋的樣本（約10
秒）。將試管放置至少45秒。
·由於離白血球水平（＞60×109／L）、纖維物質及血細胞不完全溶解，而減少樣本流過濾
膜。如果在15－25℃溶解時間之後稀釋樣本仍然混濁，離心，用上清液加到卡片上。
·不準確的吸管要進行校正吸管。
·在R2結合物完全浸濕卡片之前就加R3洗滌液，這將導致假陽性結果。
·血細胞不完全溶解或滲濾受阻也可能導致假陽性結果。

Ⅲ 蛋白質濃度測定 雙縮脲法實驗步驟誰能介紹下

蛋白質濃度測定 雙縮來脲法原理

將尿自素加熱，兩分子尿素放出一分子氨而形成雙縮脲（NH2-CO-NH-CO-NH2）。
雙縮脲在鹼性溶液中與Cu2+結合生成紫色絡合物，這一呈色反應稱為雙縮脲反應。蛋白質分子中的肽鍵類似雙縮脲結構，故亦能呈雙縮脲反應。
生物幫上面有這方面的詳細介紹， 生物問答 http://www.bio.com/

Ⅳ 斐林試劑和雙縮脲試劑有什麼區別

1、作用不同：

斐林試劑是新配製的溶液，它在加熱條件下與醛基反應，被還原成磚紅色的沉澱，可用於鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色→棕色→磚紅色（沉澱）。

鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在鹼性環境下的與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應。

2、配置方法不同：

斐林試劑配製方法：0.1 g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配製方法是將50 g氫氧化鈉和137 g酒石酸鉀鈉溶於500 mI蒸餾水中(貯於帶橡皮塞的瓶中)。乙液配製方法是將34.5 g結晶硫酸銅溶於500 ml水中，加0.5 mI硫酸。混合均勻。

雙縮脲試劑A是質量分數為0.1 g/mL的NaOH水溶液；雙縮脲試劑B是質量分數為0.01 g/mL的CuSO4水溶液.先在待測液中加入雙縮脲試劑A 3mL，振盪均勻（營造鹼性環境），再加入1～2滴雙縮脲試劑B，振盪均勻。

3、使用方法不同：

斐林試劑使用時，先反溶液和溶液混合（將滴溶液滴入溶液中），而後立即使用。

雙縮脲試劑使用時，先加入溶液（2mL），振盪搖勻，造成鹼性的反應環境，然後再加入3~4滴溶液，振盪搖勻後觀察現象。

(4)雙縮脲誰發明擴展閱讀：

斐林試劑是德國化學家赫爾曼·馮·斐林在1849年發明的。常用於鑒定可溶性的還原性糖的存在。斐林試劑與單糖中的還原性糖（即醛糖）反應生成磚紅色沉澱。

雙縮脲試劑是一個用於鑒定蛋白質的分析化學試劑。它是一個鹼性的含銅試液，呈藍色，由0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。會遇到蛋白質顯紫色。

Ⅳ 班氏試劑和雙縮脲試劑有什麼區別

兩者都是制由硫酸銅和氫氧化鈉配出的，但比例不同。

本尼迪特試劑，也稱班氏試劑、本尼迪克試劑、本尼迪克試液，班乃德試劑或本尼迪特試劑，是一種淺藍色化學試劑,為斐林試劑的改良試劑
雙縮脲試劑是一個用於鑒定蛋白質的分析化學試劑。它是一個鹼性的含銅試液，呈藍色，由0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。遇到蛋白質顯紫色。
斐林試劑(Fehling's solution)是德國化學家斐林（Hermann vonFehling，1812年--1885年）在1849年發明的。它是由氫氧化鈉的含量為0.1 g/mL的溶液和硫酸銅的含量為0.05 g/mL的溶液，還有含量為0.2g/mL酒石酸鉀鈉配製而成的，其本質是新配製的氫氧化銅。

Ⅵ 血清總蛋白測定 雙縮脲比色法的原理 有誰知道

大鼠血清總蛋白含量測定（雙縮脲比色法）
一．原理
蛋白質是由許多氨基酸通過肽鍵相互結合而成。肽鍵在鹼性溶液中能與銅離子作用產生紫紅色絡合物。測定紫紅色絡合物的吸光度，能計算總蛋白的含量。
二．目的
1．掌握血清總蛋白含量的測定方法。
2．觀察陰虛大鼠模型血清總蛋白含量的變化。
3．觀察中葯對陰虛大鼠模型血清總蛋白含量的變化。
三．試劑
1．總蛋白試劑
硫酸銅0.12 mmol/L
酒石酸鉀鈉21.1 mmol/L
氫氧化鈉0.75 mmol/L
2．蛋白標准液：血清白蛋白50g/L
四．材料
1．試管（100*16mm）3支
2．移液器（P20ul、P200ul、P1000ul）各1把
3．石英比色皿（1ml）4隻
五．測定方法
單位: ul

空白管（b）
標准管（std）
測定管（s）

H2O

蛋白標准液（50.0g/L）

樣品

總蛋白試劑
10.5

－

－

1050
－

10.5

－

1050
－

－

10.5

1050

混勻，室溫放置30分鍾，以空白管校零，測定550nm處的吸光度。
六．計算
總蛋白含量（g/L）＝（測定管吸光度/標准管吸光度）×標准液濃度
七．注意事項
1．室溫放置30分鍾後必須立即測定吸光度，否則吸光度會增加。
2．實驗試劑用量較少，所以加量一定要仔細、准確。